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同时提取分离辣木籽油、蛋白质和芥子油苷
成果介绍
华南师范大学李海航教授以通讯作者在“FoodChemistry”杂志上发表题为“Simultaneousextractionandseparationofoil,proteins,andglucosinolatesfromMoringaoleiferaseeds”的研究论文，主要探讨采用梯度洗脱的高效柱色谱萃取（CCE）方法，同时提取和分离辣木籽中的油，蛋白质和芥子油苷。
辣木，系辣木科辣木属植物，分布于广东、海南、云南等地区。辣木树被称为“奇迹之树”，其叶子、花、嫩豆荚、籽实（辣木籽）可直接食用。据报道，辣木籽中含有19～47％的油，10～52％的蛋白质和2.5～20％的芥子油苷，其中辣木油含有70％以上的不饱和脂肪酸（Aviaraetal.,;Fernandesetal.,;Gopalakrishnanetal.,）。辣木籽具有抗炎，抗癌，抗微生物，降血糖，降血压等功效。目前，广泛用于化妆美容行业。
以往报道表明，提取辣木油方法包括溶剂萃取、冷压、超临界流体萃取以及水相酶提取等方法（Abdulkarimetal.,;Bhuptawatetal.,;Zhongetal.,）。辣木籽中的蛋白质是水溶性的，芥子油苷可以通过水和盐溶解，从而有效提取辣木籽中的营养物质。冷压，超临界流体萃取和水相酶法萃取方法因其产量低，成本高，处理时间长受到一定限制。同时，这些研究方法主要用于分析辣木籽中的单组物质，目前，尚无研究报道关于辣木籽资源利用的可行方法。
通过梯度洗脱的CEE方法，同时提取和分离g辣木籽中的油，蛋白质和芥子油苷。首先，用2.0MVsPE-乙醇(8:2)进行洗脱，提取出辣木油;再用4.0MVs水提取出蛋白质和芥子油苷，洗脱液作为提取物收集起来。其次，提取出的组分自动分离在乙醚相和乙醇水相进行馏分。将含辣木油的已醚相在40°C下进行真空浓缩，从而获得辣木油粗品。乙醇水相包含蛋白质和芥子油苷，通过调节至70％乙醇来分离沉淀蛋白质，再对乙醇水溶液进行真空浓缩，得到辣木籽的芥子油苷，从而，得到原油，蛋白质和芥子油苷。然后，原油在80°C下用等体积的1.0mol/LNaOH进行脱酸，在g离心力下离心10分钟，用等体积的水在70°C下洗涤10分钟进行脱胶。脱胶后的辣木油用活性炭或活性粘土进行脱色，得到22.3g精制油。另外，在烘箱中烘干蛋白质，得到33.0g蛋白质。最后，辣木籽中的芥子油苷提取物主要是GLC（4-α-鼠李糖基吡喃烷氧基-苄基芥子油酸酯），用N-丁醇分级分离去除脂溶性杂质，然后进行硅胶柱色谱分离。将洗脱液收集在1.0BV组分中，通过HPLC进行分析。将纯化的GLC的溶液进行真空浓缩，得到5.5g纯化的GLC。
TLC结果表明，辣木籽中提取出来的辣木油显示出清晰的斑点，并与TLC上的其他化合物分离。SDS-PAGE分析表明，从辣木籽中提取的蛋白，主要是由五种蛋白质组成，分子量在3.4至20kDa之间。HPLC分析表明，芥子油苷提取物只有一个主要峰，通过LC-MS鉴定为GLC。
综上所述，这项研究提供了一种高效的方法，用于同时提取和分离辣木籽中的油，蛋白质和芥子油苷。将g辣木籽装入柱中溶解，通过其相应的最佳溶剂进行色谱洗脱。仅使用2.0MVsPE乙醇和4.0MVs水提取了95％以上的辣木油，辣木蛋白和GLC，再将其纯化，获得22.3g精制油，33.0g蛋白质和5.5g纯化的GLC。辣木籽纯化后的油，蛋白质和GLC可以进一步开发为健康食品或药物。
本研究受到广东省科技计划（A），中国中央农业技术推广(-60-43)和广东省自然科学基金（A030331）的支持。
作
者
简
介
李海航
华南师范大学教授，博士生导师，主要从事植物化学与分子生物学相关研究工作。在国内外学术期刊发表学术论文60多篇，其中SCI论文40余篇。申请发明专利12项，获授权发明专利5项。
参考文献
ChenRui,WangXiu-Juan,LiHai-Hangetal.,Simultaneousextractionandseparationofoil,proteins,andglucosinolatesfromMoringaoleiferaseeds[J].Foodchemistry,,.
论文链接
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